Giới thiệu sản phẩm Bộ nhuộm ZIEHL-NEELSEN

nam-khoa-thuoc-nhuom-vi-sinh

 HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG BỘ THUỐC NHUỘM ZIEHL NEELSEN

Nguyên tắc

Do vách tế bào của vi khuẩn Mycobacteria có lớp vỏ sáp bao bọc nên khi nhuộm với phức hợp carbon fuchsin sẽ không bị tẩy màu bởi dung dịch có tính tẩy mạnh (alcohol acid).

Thuốc thử được cung cấp

 

Thuốc nhuộm Thành phần Số lượng ĐK bảo quản
Ziehl Neelsen Carbon Fuchsin 100ml/chai x 1

Nhiệt độ phòng

Alcohol acid 100ml/chai x 1

Nhiệt độ phòng

Methylen Blue 100ml/chai x 1

Nhiệt độ phòng

Phương pháp thực hiện thử nghiệm

  1. Làm một phết bệnh phẩm hoặc vi khuẩn trên một lame sạch. Để khô tự nhiên và cố định bằng cách hơ nóng qua ngọn lửa của đèn cồn.
  2. Nhỏ vài giọt carbon Fuchsin cho phủ đều trên bề mặt phết nhuộm. Dùng que gòn tẩm alcohol 95% đốt nhẹ dưới lame để hơ nóng thuốc nhuộm, tránh đun sôi thuốc nhuộm. Thực hiện hơ nóng 03 lần trong 5 phút. Để lame nguội.
  3. Rửa nhanh bằng nước.
  4. Tẩy màu bằng cách nghiêng lame và nhỏ từ từ alcohol acid lên phết nhuộm, khi giọt alcohol acid rời khỏi lame sạch màu thì ngưng ngay.
  5. Rửa nhanh bằng nước.
  6. Nhỏ vài giọt methylen blue cho phủ đều trên bề mặt phết nhuộm và để yên trong vòng 1 phút.
  7. Rửa nhanh bằng nước.
  8. Thấm khô phết nhuộm và quan sát dưới kính hiển vi.

Biện luận kết quả

  1. Vi khuẩn kháng acid bắt màu hồng, các vi khuẩn khác bắt màu xanh biển nhạt.

Lưu ý khi thực hiện nhuộm kháng acid

  1.  Nếu có sự hiện diện của trực khuẩn kháng acid phải trả lời là AFB (+). Không được phép trả lời có trực khuẩn lao vì có nhiều loài Mycobacteria không gây bệnh hay Nocardia, Actinomyces cũng cho kết quả AFB (+).
  2. Phương pháp nhuộm kháng acid có mức phát hiện tối thiểu là
    000-100.000 AFB/ml.
  3. Những sai lầm thường gặp ảnh hưởng đến kết quả nhuộm kháng acid:
    (1) phết nhuộm quá dày; (2) carbonfuchsin bị cặn; (3) thời gian phủ màu carbonfuchsin quá ngắn; (4) dùng carbonfuchsin của phương pháp nhuộm nóng (Ziehl Neelsen) để nhuộm lạnh (Kinyoun).
  4. Đánh giá kết quả nhuộm kháng acid của mẫu đàm theo tiêu chuẩn như sau:
  • 1-2 AFB/300 quang trường +/-
  • 1-9 AFB/100 quang trường 1+
  • 1-9 AFB/10 quang trường 2+
  • 1-9 AFB/1 quang trường 3+
  • > 9 AFB/1 quang trường 4+

620170805_081729